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mRNA生产用酶解决方案
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mRNA体外合成一站式解决方案

早在30多年前,VicalIncorporated公司首次使用mRNA进行药物开发,将mRNA通过脂质体递送至体内,并发现其可在体内完成翻译。该研究为mRNA在生物医药领域的应用奠定了理论基础。2020年新冠疫情的爆发,mRNA疫苗开启了疫苗的新纪元,国内外各大药企争相涌入mRNA技术赛道。

 

mRNA疫苗的工作原理是将病毒的部分mRNA片段,以特殊的脂质膜包裹,注入人体细胞内产生抗原,再由此激发特异性免疫反应,达到形成免疫记忆的效果。

 

mRNA疫苗的特点

 

Ÿ   mRNA不进入细胞核,不会整合到人基因组上,安全性较高;

Ÿ   可激活体液免疫和细胞免疫双重免疫系统,有效性更强,保护率更高;

Ÿ   研发周期短,尤其是在应对病毒变异时,只需对S蛋白序列的碱基进行突变,就能够快速开发新型候选疫苗;

Ÿ   不需要细胞培养等过程,生产效率更高。

 

mRNA疫苗的开发包括mRNA体外合成、载体递送等过程。其中,mRNA体外合成所需的原料酶对于 mRNA疫苗的产业化生产至关重要。888.3net新浦京游戏提供全系列的GMP&非GMP原料酶,助力mRNA疫苗的产业化生产。

 

mRNA体外合成一站式解决方案

 

 

产品名称

产品编号

规格

BsaI (GMP 级)

DNRG0304012-GMP

400KU

T7 RNA 聚合酶 (GMP 级)

DNRG0304022-GMP

1MU

牛痘加帽酶 (GMP 级)

DNRG0304032-GMP

1MU

mRNA   帽 2'-O-甲基转移酶   (GMP 级)

DNRG0304042-GMP

5MU

无机焦磷酸酶 (GMP 级)

DNRG0304072-GMP

800U

鼠源 RNase抑制剂 (GMP   级)

DNRG0304062-GMP

2.2MU

DNase I (GMP 级)

DNRG0304052-GMP

40KU

 

线性模板制备

 

工业生产中,mRNA体外转录的模板通常是质粒,在体外转录前需要对质粒进行线性化处理,因为转录反应会延续至DNA模板的末端,环状质粒模板会转录生成大小不同的mRNA转录本,线性化可以确保获得确定长度及序列的mRNA转录本。

 

mRNA体外合成一站式解决方案

 

相关产品

 

Bsal

 

线性化模板可通过限制性内切酶酶切质粒获得,需确保酶切产物为平末端或5’端突出结构。需使用IIS型限制性内切酶,IIS型限制性内切酶的酶切位点在识别位点以外,酶切完5’端突出。BsaI是一种IIS型限制性内切酶,它的识别位点为6个碱基组成,具有高度特异性而极不容易出现‘类’酶切位点,能够有效避免出现非特异性的酶切。

 

产品数据

 

mRNA体外合成一站式解决方案

订货信息

 

产品名称

产品编号

规格

BsaI (GMP 级)

DNRG0304012-GMP

400KU

 

mRNA体外转录

 

体外转录(IVT)是以线性化质粒为模板,在RNA转录酶、NTP等条件下,模仿体内转录过程生成mRNA的技术。质粒模板通常使用的启动子为T7启动子,其转录强度较高,是目前原核表达应用最广泛的启动子。T7 RNA Polymerase(T7 RNA聚合酶)对T7启动子具有高度特异性,且其活性较高,在Inorganic Pyrophosphatase、Murine RNase Inhibitor、DNaseI的辅助下,合成高产量的mRNA。

 

mRNA体外合成一站式解决方案

 

相关产品

 

T7 RNA聚合酶

 

本品为重组E.coli 表达的T7噬菌体DNA编码的蛋白,是一种高度特异性识别T7启动子序列(5’-TAATACGACT CACTATAGGG-3’)的 DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。以含有T7启动子序列的单链或双链DNA为模板,NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA或双链DNA模板链互补的RNA。

 

产品数据

 

mRNA体外合成一站式解决方案

 

订货信息

 

产品名称

产品编号

规格

T7 RNA 聚合酶 (GMP 级)

DNRG0304022-GMP

1MU

 

无机焦磷酸酶

 

本品是重组大肠杆菌表达酵母来源的无机焦磷酸酶(PPase),是一种催化一分子焦磷酸盐转化为两分子磷酸盐离子的酶,使无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐,这是一个高放能的反应,因此,此反应可偶联到一些热力学上不利的转化,以便驱动这些转化进行完全。在分子生物学中可用于体外转录反应中提高mRNA产量。

 

无机焦磷酸酶作用原理

 

mRNA体外合成一站式解决方案 

 

产品数据

mRNA体外合成一站式解决方案

 

订货信息

产品名称

产品编号

规格

无机焦磷酸酶 (GMP 级)

DNRG0304072-GMP

800U

 

鼠源RNase抑制剂


本品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的鼠源RNase抑制剂,能抑制 RNase A, RNase B 或 RNase C 这三种酶的活性,主要参与mRNA体外转录中对mRNA的保护。


产品名称

产品编号

规格

鼠源 RNase抑制剂 (GMP   级)

DNRG0304062-GMP

2.2MU

 

DNaseI(脱氧核糖核酸酶I)


DNase I是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯键,产生5'-磷酸基团和 3'-OH的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。

 

产品数据

mRNA体外合成一站式解决方案

 

订货信息

产品名称

产品编号

规格

DNase I (GMP 级)

DNRG0304052-GMP

40KU

 

mRNA加帽系统

 

体外转录的mRNA的5’端含有三磷酸基团,具有很强的免疫原性,若将其递送至体内,会激活固有免疫应答,RIG-1会识别三磷酸基团,导致其无法在体内正确翻译出抗原蛋白。因此,在工业生产中需对 mRNA进行加帽修饰以逃避固有免疫系统。使用酶法进行加帽,首先应使用牛痘加帽酶使mRNA的5'端带上帽0帽子,再进一步使用mRNA 帽 2'-O-甲基转移酶 (GMP 级),使帽0转变为帽1。帽1的免疫原性比帽0低,不易被RNA 传感器识别。

mRNA体外合成一站式解决方案

mRNA酶法加帽

 

产品数据

mRNA体外合成一站式解决方案

 

产品名称

产品编号

规格

牛痘加帽酶 (GMP 级)

DNRG0304032-GMP

1MU

mRNA   帽 2'-O-甲基转移酶   (GMP 级)

DNRG0304042-GMP

5MU

 


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