888.3net新浦京游戏(国际)官网-Best Gaming Platform

疫苗
首页 > 应用 > 疫苗 > DNA 疫苗

DNA 疫苗

基于核酸的诊断、预后和治疗平台是很有前途的工具,由于其独特的特性,如热稳定性、抗变性和简单存储,它们正在取代旧的基于蛋白质的平台。一个好的疫苗平台应该是快速的、简单开发的、可再现的、热稳定的,并且可在降低开发成本和风险的情况下制造。 DNA 平台解决了其中的许多目标。

 

DNA 疫苗是 DNA 载体,例如细菌质粒、小环 DNA 或线性、共价闭合的简约表达构建体,它们包含至少一个编码目标抗原的真核表达盒。表达盒通常由真核启动子/增强子、抗原基因和 poly(A) 信号序列组成,它们对于抗原在真核细胞(例如肌肉细胞)中的表达至关重要。 DNA 疫苗在临床前研究中显示出令人信服的安全性和免疫原性。几种 DNA 疫苗目前已获准用于大型动物(如马)和小型动物(如鸡)的兽医使用。而印度基于ZyCoV-D 3 期试验的安全性、免疫原性和有效性结果,授予其紧急使用授权,这也是 DNA 疫苗的里程碑式进展。西尼罗河病毒 (WNV)、埃博拉病毒和马尔堡病毒以及 SARS-CoV-2 的 DNA 疫苗临床试验结果表明,抗体在免疫几周后在人体中产生。但在临床试验中也有很多免疫原性差的情况。目标抗原和构建、制剂和递送方法的优化似乎是 DNA 疫苗免疫原性的关键因素。

 

在过去几年中,DNA 疫苗领域取得了许多进展。 DNA 构建、递送和给药途径的进步以及分子佐剂的使用增强了 DNA 疫苗的免疫原性。 DNA 免疫有望彻底改变疫苗领域。 DNA 疫苗的制造和储存成本较低,使其成为全球疫苗接种的理想候选疫苗,即使在低收入国家也是如此。

 

质粒 DNA 是通过转基因细菌产生的,通常是大肠杆菌(E.Coli)。在临床前和临床规模下,遵循良好生产规范 (GMP) 生产质粒 DNA 需要仔细开发最佳和经济的商业工艺。细菌细胞在发酵条件下生长,通常在由化学成分确定的物质,如葡萄糖或甘油作为碳源、盐、维生素等组成的成分确定的或基本的细胞培养基中生长。发酵后,通过离心或微滤收集细菌细胞。然后采用化学、物理或机械方法进行细胞裂解。细胞裂解产生的裂解液含有细胞碎片、质粒 DNA 和可溶性杂质。切向流过滤等澄清技术用于从裂解液中去除固体。然后,采用污染物沉淀、质粒沉淀、层析纯化(阴离子交换层析,然后是疏水相互作用层析,有时是尺寸排阻层析)等几个纯化步骤来去除污染物(例如宿主蛋白、内毒素、RNA、基因组 DNA 和质粒 DNA 的线性和开环形式)。纯化的质粒 DNA 与赋形剂和佐剂一起配制,并通过除菌过滤器进行过滤。

 

小环 DNA 是通过在E.COli中诱导亲本质粒的分子内重组而产生的。例如,重组酶,如φC31整合酶,和限制酶(RE),如I-SceI,的表达由阿拉伯糖诱导基因表达系统诱导。重组酶介导其识别序列之间的位点特异性重组,产生两个不同的环状 DNA 分子(i)含有真核表达盒的小环 DNA 和(ii)由细菌骨架组成的迷你质粒(MP),MP 可被诱导的 RE 特异性降解。然后可以提取、纯化和制剂小环 DNA,类似于用于 DNA 质粒的方法。


相关产品
联系我们
  • 电话:021-6434 0155
  • 邮箱:marketing@duoningbio.com
  • 地址:上海市松江区民强路1525号申田新办公领地30幢
留言

Copyright © 888.3net新浦京游戏 版权所有 网站地图 | 技术支持:Reanod 备案号:沪ICP备20017026号-2

WeChat
WeChat

留言框-

888.3net新浦京游戏

021-64340155

XML 地图